Hoefer SE640 - Manual (Page 24)

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Preparar la muestra
Aumentar la densidad de líquido de muestra con 10%
de glicerol o sacarosa. Añadir un tinte de seguimiento
como el rojo fenol, azul de bromofenol, o Y. pironina
Para geles de proteínas SDS, utilice 2X tampón de
tratamiento para desnaturalizar muestras líquidas y en
seco en un tubo de ensayo.
Para soluciones de proteínas líquidas, añadir un
volumen igual de tampón de 2X.
Para secar las muestras de proteínas, añadir volúmenes
iguales de tampón de muestra 2X y agua de alta
pureza para alcanzar la concentración deseada.
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Se calienta el tubo en agua hirviendo durante 90
segundos, luego se deja enfriar a temperatura
ambiente. Las muestras tratadas se pueden almacenar
a -40 a -80 °C durante carreras futuras.
Proteínas de membrana de calor a 60 °C durante 20
minutos. No conserve la muestra utilizada a 4 °C.
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Sirvieron de base al de la muestra en los pocillos
utilizando una microjeringa de punta fina o un gel de
carga punta de la pipeta.
Tabla 1. Volumen de la muestra para el estándar de
tamaños de peine, volumen de la muestra (µl) por la
profundidad de 1 mm
número espesor de peine (mm)
de pozos 0,75 1,0 1,5
10 6,2 8,3 12,4
12 5,8 7,7 11,5
15 4,3 5,7 8,6
20 3,1 4,1 6,2
28 2,1 2,7 4,1
1/1 (ref/prep) 4/90 6/121 9/183
1/2 (ref/prep) 4/85 6/112 9/171
Nota: Una vez que las muestras
se encuentran en los pozos,
tener cuidado de no sacudir
los sándwiches de forma que
las muestras no se derrame o
mezclado.