Manual de instrucciones – Hoefer HE-PLUS System User Manual

Page 11

Advertising
background image

 p1

Manual de instrucciones

A. Directrices para la selección tampones 
de electroforesis de gel y concentraciones

Los dos buffers más comúnmente utilizados
para electroforesis horizontal de ADN de cadena
doble en geles de agarosa son Tris-acetato-EDTA
(TAE) y Tris-Borato-EDTA (TBE). Mientras que
las potencias de la resolución de estos tampones
son muy similares, la capacidad de amortigua-
miento en relación son muy diferentes, que
confiere distintos atributos de ejecución que se
resumen a continuación:

TAE

Tris-acetato ha sido tradicionalmente el tampón más 
comúnmente utilizado. Sin embargo, su capacidad de 
amortiguación relativamente bajo se agotará durante 
la electroforesis extendida, por lo que la recirculación 
de amortiguación necesaria en carreras superiores a 
140 mA horas. Las ventajas potenciales del uso de 
tampón TAE en tampón TBE incluyen una resolución 
superior de ADN superenrollado y la migración de 
aproximadamente un 10% más rápido de la doble 
cadena de fragmentos de ADN lineales.

TBE

Tris-borato es significativamente mayor capacidad 
tamponante y su consumo de corriente relativamente 
baja elimina la necesidad de recirculación en todos 
menos los recorridos más largos (> 300 mA-hora). 
Los sistemas tampón TBE no se recomiendan cuando 
los fragmentos se recuperaron del gel después de 
electroforesis.

Advertising