Leica Biosystems ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - Manual (Page 30)

DS9477
Page 29
ChromoPlex ™ 1 Dual Detection for BOND
Catalog No: DS9477
Tiltenkt bruk
Dette deteksjonssystemet er for bruk i in vitro diagnostikk.
ChromoPlex
™ 1 Dual Detection er et biotinfritt antistoff-konjugat-system som inneholder polymerisk pepperrot-peroksidase (HRP)-
bindinger og polymerisk basisk fosfatase (AP)-bindinger til deteksjon av vevsbundne primære IgG-antistoffer fra mus og kaniner. Det er
beregnet til farging av seksjoner av formalinfiksert parafininnstøpt vev på det automatiserte BOND-systemet.
Klinisk tolkning av enhver fargedannelse eller fravær av slik fargedannelse bør suppleres med morfologiske studier. Egnede kontroller
må vurderes i sammenheng med pasientens sykehistorie og andre diagnostiske tester av kvalifisert patolog.
ChromoPlex 1 Dual Detection må brukes i samsvar med korrekt laboratoriepraksis for bruk i vevskontroll. Som en ekstra sikkerhet, bør
laboratoriene farge alle pasientprøver sammen med positive, negative og andre vevspesifikke kontroller etter behov.
Sammendrag og forklaring
Immunohistokjemiske teknikker kan brukes til å demonstrere tilstedeværelse av antigener i vev og celler (se “Bruk av BOND-reagenser”
i din BOND-brukerdokumentasjon).
ChromoPlex 1 Dual Detection bruker en helt ny, kontrollert polymeriseringsteknologi til å produsere polymeriske antistoffkonjugater med
HRP-bindinger og AP-bindinger. Deteksjonssystemet unngår bruk av streptavidin og biotin, og eliminerer dermed uspesifikk farging på
grunn av endogent biotin.
ChromoPlex 1 Dual Detection fungerer på følgende måte:
Prøven inkuberes med hydrogenperoksid for å dempe endogen peroksidaseaktivitet. •
Det tilføres en brukerlevert spesifikk cocktail av primære mus- og kanin-antistoffer. •
Poly-HRP IgG-reagens lokaliserer muse-antistoffer. •
Poly-AP IgG-reagens lokaliserer kanin-antistoffer. •
Det første substrat-kromogenet, 3,3 ‘-diaminobenizidintetrahydroklorid (DAB), synliggjør muse-antistoffer gjennom et brunt bunnfall. •
Det andre substrat-kromogenet, (Fast Red), synliggjør kanin-antistoffer gjennom et rødt bunnfall. •
Kontrastfarging med hematoxylin (blå) muliggjør visualisering av cellekjerner. •
Bruk av ChromoPlex 1 Dual Detection i kombinasjon med det automatiserte BOND-systemet reduserer muligheten for menneskelige feil
og iboende variabilitet på grunn av individuell reagensfortynning, manuell pipettering og reagenstilsetning.
Medfølgende reagenser
De medfølgende reagensene er nok til 25 individuelle BOND-farginger eller maksimalt 100 preparater.
For å få maksimalt 100 preparater ut av dette deteksjonssystemet, må preparatene prepareres i grupper på 4 eller mer i et
rekkefølgesystem. Farging av preparat grupper på mindre enn 4 vil resultere i færre fargete preparater totalt.
Peroxide Block (15 mL) 3 - 4 % hydrogenperoksid. 1.
Polymer mHRP (15 mL) Poly-HRP anti-mus inneholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvann og 0,09 % ProClin 2. ™ 950.
Polymer rAP (15 mL) Poly-AP anti-kanin inneholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvann og 0,09 % ProClin 950. 3.
DAB Part 1 (2 mL) 66 mM 3,3’-diaminobenzidintetrahydroklorid i en stabilisatorløsning. 4.
DAB Part B (35 mL) ≤0,1% (v/v) hydrogenperoksid i en stabilisatorløsning. 5.
Red Part A (5.5 mL) Aktivator inneholdende 0,5 % ProClin 950. 6.
Red Part B (1.0 mL) Substrat. 7.
Red Part C (1.0 mL) Substrat. 8.
Red Part D (35 mL) Bufferløsning inneholdende 0,5% ProClin 950. 9.
Hematoxylin DS9477 (15 mL) <0,1% hematoksylin. 10.
Fortynning og blanding
ChromoPlex 1 Dual Detection er optimalisert for bruk på BOND -systemet.
Rekonstituering, blanding, fortynning eller titrering av disse reagensene er ikke nødvendig.
Nødvendige materialer som ikke medfølger
Monteringsmedia, som er kompatibelt med ChromoPlex 1 Dual Detection (se Forholdsregler).
Se “Bruk av BOND-reagenser” i BOND-brukerdokumentasjonen for en komplett liste over materialer som er nødvendige til behandling
av prøvene og immunohistokjemisk farging ved bruk av BOND-systemet.
Oppbevaring og stabilitet
Oppbevares ved 2-8 °C. Må ikke fryses. Må ikke brukes etter utløpsdatoen som er angitt på etiketten på brettets håndtak. Må
umiddelbart nedkjøles til 2 – 8 °C etter hver bruk.
Dette produktet viser ingen tydelige tegn til ustabilitet; det skal derfor utføres positive og negative kontroller samtidig med ukjente prøver
(se “Kvalitetskontroll” i avsnittet “Bruk av BOND-reagenser” i BOND-brukerdokumentasjon).
Hvis det observeres uventet farging som ikke kan forklares med variasjoner i laboratorieprosedyrer, og det er mistanke om et problem
ved deteksjonssystemet, kontakt straks din lokale forhandler eller Leica Biosystems’ regionskontor.
Andre oppbevaringsbetingelser enn de som er nevnt ovenfor må verifiseres av brukeren
1 .