Bio-Rad Mini-PROTEAN® TGX™ Precast Gels for 2-D Electrophoresis - Manual (Page 5)

Chapter 10: Detection . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
10.1 SDS-PAGE and Native PAGE Detection . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
10.2 Peptide Gel Staining . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
10.3 TBE Gel Staining . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
10.4 TBE-Urea Gel Staining . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
Chapter 11: Blotting . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
11.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
11.2 Transfer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
11.2.1 Transfer Buffers. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
11.2.2 Wet Transfer Using the Mini Trans-Blot ® Module. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
11.2.3 Transfer Using the Trans-Blot ® Turbo ™ System. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
11.2.4 Semi-Dry Transfer Using the Trans-Blot ® SD Cell . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
11.3 Total Protein Blot Stains . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
11.4 Immunodetection . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Chapter 12: Troubleshooting . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
Appendix A: Quick Start Guides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
SDS-PAGE (Mini-PROTEAN TGX Gels) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32
Native PAGE (Mini-PROTEAN TGX Gels) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
Peptide Analysis (Mini-PROTEAN Tris-Tricine Gels) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
Nondenaturing Nucleic Acid PAGE (Mini-PROTEAN TBE Gels). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
Denaturing Nucleic Acid PAGE (Mini-PROTEAN TBE-Urea Gels) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
Appendix B: Buffers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
Appendix C: Related Literature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
Appendix D: Ordering Information . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41