Bio-Rad VINEO™ Brettanomytest PCR Kit - Manual (Page 17)

1 - INTRODUCTION
Brettanomyces bruxellensis est une levure responsable de la présence
des 4-ethyl Phénol et 4-ethyl Guaiacol dans les boissons de type vins, jus
de fruits et bières impliquant des pertes économiques importantes. Dans
les vins, sa présence est difficile à détecter par les méthodes de culture
classiques qui sont longues et non spécifiques.
La détection rapide, spécifique et précoce de cette levure dans le
processus d’élaboration des vins permettrait cependant à l’œnologue et
au producteur de prendre des mesures de prévention et de l’éliminer
avant l’apparition du caractère phénolé, caractéristique de l’altération par
cette levure. Face à la méthode microbiologique traditionnelle, la biologie
moléculaire apporte des solutions de détection à de hauts niveaux de
rapidité, de sensibilité et de spécificité.
Le diagnostic de la présence de cette levure doit permettre de déterminer à
quel niveau de risque se trouve le vin et comment évolue ce risque dans le
temps. Ce risque est variable selon le niveau de contamination du vin. Ainsi
un outil de quantification adapté permet de déterminer si (i) la population est
en faible quantité et donc que le risque est faible voire maîtrisé, (ii) en quantité
intermédiaire ou critique, dans ce cas le vin doit être surveillé, un suivi régulier
s’impose, le vin peut être traité (iii) et enfin si la population est très importante,
et dans ce cas le risque de production des phénols volatils l’est aussi, une
action immédiate et urgente s’impose sur le vin.
Dans tous les cas un suivi régulier est préconisé. Il est important de suivre
l’évolution des Brettanomyces bruxellensis au sein du vin.
VINEO™ Brettanomytest PCR Kit est un test quantitatif permettant la
détection spécifique de Brettanomyces bruxellensis dans les vins et les
moûts en fermentation par la technique de polymérisation en chaîne en
temps réel (RT-PCR). Une séquence d’ADN spécifique de Brettanomyces
bruxellensis est amplifiée et détectée simultanément grâce à une sonde
fluorescente. La mise en œuvre de ce test permet l'obtention d'un résultat
quantitatif moins de 3h après l’extraction d’ADN (VINEO™ Extract DNA Kit,
354-8100). Les logiciels d’analyse adaptés à ce test, Opticon Monitor™ ou
CFX Manager™ Industrial Diagnostic Edition, permettent par une analyse
automatique et quantitative, de mesurer le risque Brettanomyces
bruxellensis dans l’échantillon de vin analysé. Une interprétation du niveau
de risque est ainsi proposée à l’utilisateur. Elle est liée au nombre
d’UFC.mL-1 (Unité Formant Colonie) détecté dans le vin :
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