Bio-Rad VINEO™ Brettanomytest PCR Kit - Manual (Page 31)

1 - INTRODUCCIÓN
La Brettanomyces bruxellensis es una levadura responsable de la
presencia de 4-etil fenol y 4-etil guayacol en bebidas como los vinos, los
zumos de frutas y las cervezas que causan pérdidas económicas
importantes. Resulta difícil detectar su presencia en los vinos mediante los
métodos de cultivo clásicos, que son largos y no específicos.
Sin embargo, la detección rápida, específica y precoz de esta levadura en
el proceso de elaboración de los vinos permitiría al enólogo y al productor
tomar medidas de prevención y eliminarla antes de la aparición del
carácter fenolado característico de la alteración provocada por esta
levadura. Frente al método microbiológico tradicional, la biología
molecular ofrece soluciones de detección con elevados niveles de
rapidez, sensibilidad y especificidad.
El diagnóstico de la presencia de esta levadura debe permitir determinar
el nivel de riesgo en que se encuentra el vino y cómo evoluciona dicho
riesgo con el tiempo. El riesgo varía según el nivel de contaminación del
vino. Así pues, una herramienta de cuantificación adaptada permite
determinar si: a) existe una pequeña población y, por tanto, el riesgo es
bajo o está controlado; b) existe una población intermedia o crítica, en
cuyo caso el vino debe ser vigilado, es necesario hacer un seguimiento de
forma regular y puede tratarse el vino; o c) la población es considerable,
en cuyo caso también lo es el riesgo de producción de fenoles volátiles, y
se requiere actuar de forma inmediata y urgente sobre el vino.
En todos los casos se recomienda realizar un seguimiento regular. Es
importante seguir la evolución de las Brettanomyces bruxellensis en el vino.
El kit VINEO™ Brettanomytest PCR Kit es una prueba cuantitativa que permite
detectar de forma específica la Brettanomyces bruxellensis en los vinos y
mostos en fermentación mediante la técnica de reacción en cadena de la
polimerasa en tiempo real (RT-PCR). Se amplifica y detecta simultáneamente
una secuencia de ADN específica de la Brettanomyces bruxellensis gracias a
una sonda fluorescente. La aplicación de esta prueba permite obtener un
resultado cuantitativo en menos de 3 h tras la extracción de ADN (VINEO™
Extract DNA Kit, 354-8100). Los softwares diseñados para este análisis
Opticon Monitor™ o CFX Manager™ Industrial Diagnostic Edition permiten la
monitorización del riesgo derivado de la presencia de Brettanomyces
bruxellensis en la muestra de vino analizada. Además, se ofrece al usuario una
interpretación del nivel de riesgo en relación con el número de UFC/mL-1
(unidades formadoras de colonias) detectado en el vino:
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